الببتيدات الحيوية|تخليق الببتيد الحيوي|الببتيدات لتنقية الألفة|العلوم-الببتيد

 

وصف ميتا

 

هل تحتاج إلى الببتيدات الحيوية لتنقية الألفة أو ELISA؟ توفر شركة Science-Peptide خدمة الببتيدات الحيوية الاحترافية، التي تدعم محطة N-، ومحطة C-، وسلسلة -جانب الليسين وغيرها من العلامات المحددة للمواقع-، والنقاء العالي، والتسليم السريع، مرحبًا بك للاستفسار.

 

في أبحاث علوم الحياة وتطوير الكواشف التشخيصية، تعد الببتيدات المحتوية على بيوتينيل مثالية لتنقية الألفة، وELISA، وقياس التدفق الخلوي، والكيمياء المناعية، وسيناريوهات تحليل التفاعلات الجزيئية بسبب-تقاربها العالي للغاية مع Avidin أو Streptavidin.Science-الببتيد هي شركة رائدة في توفير الببتيدات المحتوية على بيوتينيل عالية الجودة. مع ما يزيد عن 20 عامًا من الخبرة في تصنيع الببتيد، توفر لك Science{5}}Peptide لك-ببتيدات مخصصة ذات جودة عالية - بدءًا من اختيار مواقع وضع العلامات، وأنواع التعديل وفقًا لمتطلبات النقاء، ونحن نقوم بتصميم-التصميم وفقًا لسيناريوهات التطبيق الخاصة بك لضمان إمكانية استخدام كل ببتيد يحتوي على Biotinylated في تجاربك. يتم تخصيص الببتيدات وفقًا لتطبيقك للتأكد من أن كل ببتيد يحتوي على البيوتينيل يعمل بشكل ثابت في تجاربك. سواء بكميات بالملليجرام للبحث أو بكميات جرامية للكواشف التشخيصية، فإننا نضمن اتساق الدفعة من -إلى-الدفعة واستقرار نشاط الببتيدات المحتوية على بيوتينيل.

 

ما هي الببتيدات الحيوية؟

 

الببتيدات المحتوية على بيوتين هي جزيئات من البيوتين (البيوتين) مرتبطة كيميائيًا تساهميًا في مواقع محددة في تسلسل الببتيد. البيوتين (فيتامين ب7) هو جزيء صغير (الوزن الجزيئي 244.31 دا) مع ثابت ربط يصل إلى 10¹⁵ م-¹ لبروتينات عائلة الألفة (أفينوميسين، ستريبتافيدين)، واحدة من أقوى التفاعلات غير التساهمية- المعروفة في الطبيعة. تتيح هذه الخاصية للببتيدات المحتوية على البيوتينيل التقاط الجزيئات المستهدفة بكفاءة في الأنظمة البيولوجية المعقدة، أو استخدامها كمسبار للكشف والتصوير. في تجارب محددة، غالبًا ما يعتمد اختيار الببتيدات الحيوية على إمكانية الوصول المكاني للجزيئات المستهدفة وتوافق النظام التجريبي.

 

وفقا لمواقع وضع العلامات المختلفة، يمكن تصنيف الببتيدات الحيوية على النحو التالي:
N-التكوين الحيوي الطرفي: يتم ربط البيوتين بالمجموعة الأمينية - من الببتيد، ويتم تطبيقه على الببتيدات التي لا تشارك مجموعتها الطرفية N- في النشاط الوظيفي.
التحلل الحيوي الطرفي C-: يتم ربط البيوتين بالنهاية الكربوكسيلية للببتيد (عادة عبر الليسين أو السيستين المُدخل بشكل إضافي) وهو مناسب للأنظمة المكشوفة الطرفية C-.
سلسلة -التحلل الحيوي الجانبية: يرتبط البيوتين بالمجموعة الأمينية ε- من اللايسين (Lys)، أو مجموعة السلفهيدريل من السيستين (Cys)، أو غيرها من الأحماض الأمينية غير الطبيعية - التي تتيح وضع علامات على مواقع متعددة-.

مقدمة لأذرع المباعد: يمكن أن تؤدي إضافة أذرع مباعدة بأطوال مختلفة (على سبيل المثال. 6-حمض أمينوهيكسانويك، سلسلة PEG) بين البيوتين والببتيد إلى تقليل المقاومة المكانية بشكل فعال وتحسين كفاءة الارتباط، وهو مناسب بشكل خاص لتجارب الالتقاط القائمة على التقارب-.

page-800-600

 

العلوم-الكفاءات الأساسية للببتيدات الحيوية

 

1. مواقع وضع العلامات المتعددة المتاحة
نحن ندعم تخليق الببتيدات المحتوية على بيوتينيل في المحطة N-، والمحطة C-، والسلسلة الجانبية لليسين، والسلسلة الجانبية للسيستين وغيرها من المواقع. بالنسبة للتطبيقات التي يلزم فيها الحفاظ على الشكل الطبيعي للببتيد، سنساعدك على اختيار موضع وضع العلامات الأكثر ملاءمة لتجنب التدخل في المجال الوظيفي. على سبيل المثال، بالنسبة للببتيدات الركيزة الإنزيمية، نوصي عادةً بتسمية الببتيد البيروكسيديز في النهاية بعيدًا عن موقع الانقسام.

 

2. تصميم ذراع مساحة مرنة
بالنسبة للتطبيقات التي تتطلب تقليل المقاومة المكانية (مثل تجارب الالتقاط على الصفائح المغلفة -)، يمكننا تقديم أذرع فاصلة بأطوال مختلفة (Ahx، PEG2، PEG4، PEG12، وما إلى ذلك) للسماح بالتعرض الأكثر مرونة لجزيئات البيوتين وتحسين كفاءة الارتباط. في بعض تجارب SPR الصعبة، غالبًا ما يكون طول ذراع المباعد المناسب هو مفتاح نجاح التجربة، وسوف نوصي بأفضل الحلول وفقًا لتصميمك التجريبي.

 

3. درجة نقاء عالية وتوصيف كامل
تمت تنقية كل ببتيد معالج بالبيوتينيل بواسطة HPLC وتم تمييزه بواسطة قياس الطيف الكتلي (MS) للتأكد من أن الببتيد المعالج بالبيوتينيل تم ربطه بشكل صحيح وخالي من بقايا -المنتجات. بالنسبة للتسلسلات التي تحتوي على مواقع تفاعل متعددة، نستخدم استراتيجية حماية متعامدة لضمان حدوث التعديلات في المواقع المحددة. يتم توفير تقارير مفصلة عن شهادة توثيق البرامج عند التسليم، بما في ذلك النقاء والوزن الجزيئي وتأكيد موقع التعديل. بالنسبة للتطبيقات المهمة، يمكن أيضًا توفير بيانات التحقق من صحة نشاط ربط البيوتين.

 

4. مرنة في الحجم
بدءًا من كميات الملليجرام المخصصة للبحث العلمي وحتى كميات الجرام الخاصة بالكواشف التشخيصية، فإننا قادرون على توفير إنتاج مستقر. بالنسبة للمشروعات التي تتطلب توريدًا طويل الأمد-، يمكننا توقيع اتفاقيات الدُفعات لضمان تناسق الدُفعات من -إلى-الدُفعات. لقد قمنا بتوريد الببتيدات الحيوية لعدد من شركات الكواشف التشخيصية لعدة سنوات بسيرة ذاتية<5% between batches.

 

5. متوافق مع مجموعة واسعة من مجموعات التعديل
يمكن إدخال تعديل البيوتين في وقت واحد مع تعديلات أخرى (على سبيل المثال، وضع العلامات الفلورية، الفسفرة، الغليكوزيل، PEGylation، وما إلى ذلك) لتلبية متطلبات وضع العلامات المتعددة. على سبيل المثال، يمكن استخدام الببتيدات ذات العلامات الثنائية- مع كل من البيوتين وFITC لالتقاط التقارب واكتشاف التألق المتزامن، في حين يمكن استخدام مجموعة تعديلات البيوتين والفسفرة للكشف عن الأجسام المضادة الخاصة بالفسفرة-.

 

المعلمات التقنية وقدرات التخصيص

 

حدود

وصف

طول البولي ببتيد

2-189 حمض أميني

مواقع العلامات

N-طرف، C-طرف، سلسلة Lys الجانبية، سلسلة Cys الجانبية، أحماض أمينية أخرى غير طبيعية

ذراع الفاصل

لا شيء، Ahx (حمض 6-أمينوهيكسانويك)، PEG2، PEG4، PEG12، أخرى مخصصة

نوع البيوتين

البيوتين التقليدي، البيوتين-PEG، البيوتين-XX (الذراع الطويلة)

مقياس اصطناعي

مليجرام، جرام، مائة جرام

مستوى النقاء

>70%, >75%, >80%, >85%, >90%, >95%, >98% اختياري

برنامج مراقبة الجودة

نقاء HPLC، تأكيد الوزن الجزيئي MS

شكل التسليم

مسحوق مجفف بالتجميد (أنبوب أو زجاجة)

 

التطبيقات الشائعة للببتيدات الحيوية

 

1. تنقية الألفة
يمكن استخدام الببتيدات المحتوية على البيوتينيل المثبتة على راتينج الستربتافيدين لتنقية البروتينات المستهدفة أو الأجسام المضادة التي ترتبط بها على وجه التحديد. هذه الطريقة لطيفة وفعالة، وتستخدم على نطاق واسع في دراسات تفاعل البروتين. لقد قمنا بتركيب الببتيدات المحتوية على بيوتينيلات لأحد العملاء لتنقية عامل النسخ المكتشف حديثًا، وتم زيادة معدل التنقية بنسبة 30% في تشغيل واحد.

 

2. ELISA مع فحص صفيحة ميكروسكوبية
يمكن استخدام الببتيدات المحتوية على بيوتينيل كمستضدات مغلفة أو مجسات التقاط للكشف اللوني بالاشتراك مع الإنزيم -المسمى Streptavidin (SA-HRP) لفحص الأجسام المضادة أو تحديد الحاتمة أو تشخيص أمراض المناعة الذاتية. تتوفر مجموعة متنوعة من خيارات ذراع المباعد لتحسين حساسية الفحص.

 

3. التدفق الخلوي وفرز الخلايا
من خلال وضع علامات على مستقبلات سطح الخلية باستخدام الببتيدات المحتوية على بيوتينيل وإضافة الستربتافيدين المسمى بالفلورسنت، يمكن تحقيق التحليل النوعي والكمي للمستقبلات أو فرز الخلايا المغناطيسية. لمثل هذه التطبيقات، نوصي باستخدام الببتيدات الحيوية مع أذرع فاصل PEG لتقليل المقاومة المكانية.

 

4. رنين البلازمون السطحي (SPR) وتداخل الأغشية الحيوية (BLI)
يمكن استخدام الببتيدات الحيوية المثبتة على رقائق مستشعر الستربتافيدين لتحليل حركية ربط الببتيدات لاستهداف البروتينات في الوقت الفعلي، وهي طريقة شائعة لفحص الأدوية. لقد قدمنا ​​الببتيدات الحيوية عالية الجودة لتحليل SPR للعديد من شركات الأدوية مع إمكانية تكرار البيانات بشكل ممتاز.

 

5. الكيمياء المناعية وتلطيخ الأنسجة
يمكن استخدام الببتيدات المحتوية على البيوتينيل كمسبارات للكشف عن أهداف محددة في أقسام الأنسجة وتضخيم الإشارة من خلال دمجها مع الإنزيم المسمى الستربتافيدين. بالنسبة للعينات المعقدة مثل مقاطع البارافين، فإننا نقدم الببتيدات المحتوية على البيوتينيل مع ذراع فاصل طويل لتحسين التلوين.

 

6. اسحب-لأسفل مع قياس الطيف الكتلي
يمكن استخدام الببتيدات المحتوية على البيوتينيل "لسحب" البروتينات المتفاعلة من ليساتس الخلية وتحديد شركاء الارتباط الجدد عن طريق قياس الطيف الكتلي. تتوفر الببتيدات المحتوية على البيوتين في خيار وضع العلامات على البيوتين الذي لا يتداخل مع إشارة قياس الطيف الكتلي.

 

عملية تخليق الببتيدات الحيوية

 

01/

التواصل الاحتياجات
يمكنك توفير تسلسل الببتيد وموقع وضع العلامات المطلوب ومتطلبات ذراع المباعد ومستوى النقاء والجرعة. يمكننا أن نوصي بأفضل حل لوضع العلامات وفقًا لتطبيقك. على سبيل المثال، بالنسبة لنظام الفحص الذي يتطلب حساسية عالية، نوصي باستخدام الببتيدات الحيوية مع ذراع فاصل PEG.

02/

تصميم اصطناعي
اختر استراتيجية الحماية المناسبة وفقًا لموقع وضع العلامات. على سبيل المثال، يمكن ربط العلامات الطرفية N- مباشرة بالبيوتين بعد تجميع سلسلة الببتيد، بينما تتطلب العلامات الجانبية - استخدام الأحماض الأمينية المحمية بشكل متعامد (على سبيل المثال، Lys(Mtt))، والتي يتم نزع حمايتها بشكل انتقائي ثم تقترن بالبيوتين. بالنسبة للتسلسلات التي تحتوي على مواقع تفاعل متعددة، قمنا بتحسين ظروف التفاعل لضمان وضع علامات محددة.

03/

تخليق الببتيد وتعديله
نحن نستخدم تخليق الطور الصلب لتجميع سلسلة الببتيد خطوة بخطوة وإدخال البيوتين في الموضع المحدد. نحن نستخدم مواد خام عالية الجودة ومراقبة صارمة للعملية لضمان كفاءة كل خطوة من خطوات التوصيل. بالنسبة للببتيدات المحتوية على بيوتينيلات التي تحتوي على روابط ثاني كبريتيد، نستخدم استراتيجية أكسدة مستهدفة لتجنب عدم التطابق.

04/

قطع وتنقية
بعد التوليف، تم قطع الببتيد من الراتينج وإزالة مجموعات الحماية. تمت تنقية الببتيد الخام بواسطة HPLC التحضيري إلى درجة النقاء المستهدفة. بالنسبة للببتيدات غير القابلة للذوبان، قمنا بتحسين ظروف التنقية لضمان العائد.

05/

ضبط الجودة
تحليل HPLC: للتأكد من أن النقاء مطابق للمتطلبات
قياس الطيف الكتلي (MS): يتحقق من صحة الوزن الجزيئي ويؤكد أن البيوتين قد تم ربطه بنجاح

06/

توصيل
يتم توفير المسحوق المجفف بالتجميد وتقرير مفصل عن شهادة توثيق البرامج، بما في ذلك رقم الدفعة الاصطناعية والنقاء والوزن الجزيئي وظروف التخزين وتوصيات الاستخدام. يمكن تتبع جميع البيانات للنشر أو الإبلاغ.

 

page-800-1067
page-800-1067
page-800-1067

 

لماذا تختار خدمة Science-الببتيدات المحتوية على بيولوجيًا؟

 

1.خبرة واسعة في مجال الاستمالة
لقد قمنا بتصنيع عشرات الآلاف من الببتيدات التي تحتوي على بيوتينيلات، والتي تغطي نطاقًا واسعًا من مواقع وضع العلامات، وأطوال الذراع المباعدة، ومجموعات التعديل. سواء كان الأمر يتعلق بوضع علامات بسيطة أو مجموعة معقدة (على سبيل المثال، كل من البيوتين والفلوريسئين)، يمكننا تحقيق ذلك بدقة. أبلغ العملاء أن الببتيدات الحيوية لدينا لديها خلفية منخفضة وإشارة قوية في ELISA وSPR.


2. مراقبة الجودة الصارمة
بالإضافة إلى HPLC وMS الروتينيين، بالنسبة للتطبيقات المهمة، يمكننا توفير التحقق من صحة النشاط المعالج بالبيوتينيل لضمان موثوقية كل دفعة من الببتيدات المحتوية على بيوتينيل في التجارب العالمية الحقيقية. نحن ندعم أيضًا التحقق من صحة NGS لمنتجات المكتبة، ولكن بالنسبة للببتيدات الفردية، فإن مراقبة الجودة كافية.


3. حجم الإنتاج المرن
لدينا نظام إنتاج مستقر بدءًا من الملليجرامات من درجة الأبحاث وحتى جرامات من درجة الكواشف التشخيصية، ويمكننا توفير{0}}اختبارات تناسق متعددة الدفعات لتلبية- احتياجات البحث أو تطوير المنتج على المدى الطويل. بالنسبة إلى الببتيدات المحتوية على مواد بيولوجية بدرجة GMP، لدينا أيضًا نظام إنتاج ناضج.


4. التسليم السريع
الطلبات الروتينية للببتيدات الحيوية (الطول<30 aa, standard modifications) can be completed within 10-15 business days. Expedited service can be negotiated to 5-7 business days.


5. الدعم الفني المهني
يتمتع مديرو المشاريع لدينا بخلفية في كيمياء الببتيد ويمكنهم تقديم المشورة لك بشأن اختيار موقع وضع العلامات وتصميم ذراع المباعد وبروتوكولات التطبيق. لقد علق العديد من عملائنا بأن نصيحتنا عملية للغاية بعد الاستشارة الأولى وساعدتهم على تجنب العديد من المخاطر الشائعة.

 

حالات العملاء

 

A diagnostic reagent company needs a line of Biotinylated Peptides for autoimmune disease detection, N-terminal biotinylated, with PEG4 spacer arm, purity >95%. لقد نجحنا في تسليم 5 جرامات من المنتج، والذي تم التحقق من صحته بواسطة ELISA بنشاط جيد، ويستخدم الآن في مجموعات التسويق الخاصة بهم. وبعد ذلك، قاموا بإضافة عدة دفعات من المنتج، وجميعها من نفس المعيار.

 

مختبر علم المناعة في التعليم العالي: تتطلب دراسة التعرف على حاتمة الخلايا التائية عدة ببتيدات متداخلة بيولوجيًا في مواقع مختلفة. قمنا بتركيب 30 ببتيدًا مُحتويًا على بيوتينيل، والتي تم تصنيفها في محطة N- أو محطة C-، واستخدمناها في تحضير رباعيات MHC، مما ساعدهم على تحديد الحواتم الجديدة بنجاح، وتم نشر النتائج ذات الصلة في مجلة علم المناعة.

 

احتاجت شركة أدوية متعددة الجنسيات إلى فحص مكتبات عرض العاثيات لاكتشاف أدوية الأجسام المضادة وكلفتنا بتصنيع الببتيدات المحاكية للبروتين المستهدف المحتوي على بيوتينيل. لقد قمنا بتصميم وتصنيع البيوتين-الذي يحتوي على مكتبة الببتيد الحلقي بسعة مكتبة تبلغ 10⁸، والتي تم استخدامها بنجاح في برنامج الفحص الخاص بهم، وتم الحصول على العديد من مركبات الرصاص حتى الآن.

 

استفسر اليوم عن تخصيص الببتيدات الحيوية الخاصة بك

 

سواء كنت بحاجة إلى ببتيد N-طرفي بسيط لإجراء اختبار ELISA أو ببتيد معقد متعدد المواقع لإجراء اختبار متعدد الإرسال، فإن Science-Peptide يتمتع بالخبرة والدقة لخدمتك. يسعد فريقنا بالمناقشة معك بعمق قبل بدء مشروعك للتأكد من أن التصميم يتوافق تمامًا مع احتياجاتك التجريبية.