شوائب تيرزيباتيد

شوائب تيرزباتيد|التحكم في شوائب التيلبتيد|التوليف المخصص للشوائب وتأكيد الهيكل|العلوم-الببتيد

التحكم في شوائب Tirzepatide - لـ GLP-1/GIP Dual-أبحاث جودة الدواء المستهدفة، وتقارير الأدوية العامة. يوفر العلوم-الببتيد تركيبًا مخصصًا للشوائب المرتبطة بالتيلببتيد، بما في ذلك ببتيدات الحذف، والشوائب المؤكسدة، ومنتجات تقشير الأحماض الدهنية، والثنائيات، وما إلى ذلك، مع بيانات التأكيد الهيكلية لدعم التحليل الطيفي للشوائب. دراسة مع بيانات التأكيد الهيكلي. مرحبا بكم في الاتصال بنا.

Tirzepatide (Tirzepatide) هو الناهض المزدوج GLP-1/GIP الذي توصل إليه Eli Lilly، وكان على قدم وساق خلال هذين العامين. وله مفعول جيد في خفض السكر ومفعول قوي في خفض الوزن، ويسمى بالنسخة المطورة من "الدواء المعجزة لإنقاص الوزن". الشركات المصنعة المحلية للأدوية الجنيسة الببتيدية، يحدق بها الكثيرون - بعد انتهاء صلاحية براءة الاختراع، من يمكنه تشغيل جودة البحث لأول مرة، والذي ستتاح له الفرصة للاستيلاء على أول عام.

 

ومع ذلك، فإن جودة التيلببتيد ليست بهذه السهولة للدراسة. وهو أكثر تعقيدًا من السيميثيكون، حيث يحتوي على 39 حمضًا أمينيًا وسلسلة جانبية من الأحماض الدهنية (حمض الإيكوسانديويك) ورابط. الشوائب التي قد تظهر أثناء عملية التوليف أعلى بكثير من تلك الموجودة في الببتيدات العادية. الببتيدات المفقودة، والشوائب المؤكسدة، ومنتجات تساقط الأحماض الدهنية، والثنائيات، والشوائب المرتبطة بالرابط-يجب أن يكون لكل منها عنصر تحكم، ويجب أن يكون كل منها واضحًا.

 

لقد تراكمت لدينا الكثير من الخبرة في تركيب الشوائب الببتيدية المعقدة. لقد تخصصنا في دراسة التيلببتيد، ونعرف ما هي الصعوبات في ملف الشوائب وما هي عناصر المراقبة الأساسية. يمكننا تخصيص تركيب العديد من عناصر التحكم في شوائب التيلبتيد وفقًا لاحتياجاتك، مع بيانات تأكيد البنية، ومساعدتك في تحديد الطريقة بحيث تقل احتمالية إصدار ملحق لك عند التقديم.

يحدد التركيب الجزيئي للتيلببتيد أن شكل الشوائب الخاص به أكثر تعقيدًا بكثير من الببتيدات العامة. عندما نقوم بدراسات الشوائب، فإننا نركز بشكل أساسي على هذه الفئات:

الببتيد المفقود
الأحماض الأمينية الـ 39، التي يتم فقدان أي منها أثناء عملية التركيب، هي شوائب. تم توزيع أوقات الاحتفاظ بالببتيدات المفقودة على HPLC على نطاق واسع، مع قطبية مختلفة للببتيدات المفقودة في مواقع مختلفة. بعضها مفقود عند الطرف N-، وبعضها في المنتصف، وبعضها بالقرب من موقع ارتباط الأحماض الدهنية. لقد تلقينا طلبًا من أحد العملاء لشراء 15 ببتيدًا مفقودًا في مواضع مختلفة لتوطين جميع الشوائب المفقودة المحتملة في العملية.

أكسدة الشوائب
يجتمع في تسلسل التيلببتيد وهو عرضة للأكسدة إلى سلفوكسيد ثم إلى السلفون. غالبًا ما تظهر الشوائب المؤكسدة في دراسات الثبات وتنمو بعد فترة من الزمن. لقد أجرينا مقارنة، في ظل ظروف متسارعة لمدة شهر، يمكن أن تنمو ذروة الأكسدة إلى أكثر من 0.3%، دون تحكم.

منتجات التخلص من الأحماض الدهنية
هذه شوائب فريدة من نوعها للتيلببتيد. ترتبط السلسلة الجانبية للحمض الدهني (حمض الإيكوسانديويك) بالليسين من خلال رابط، وقد يتم التخلص من هذا التعديل جزئيًا أثناء التركيب أو التخزين، مما يؤدي إلى إزالة الشوائب من الحمض الدهني-. والأمر الأكثر إشكالية هو أن التساقط قد يحدث في مواقع مختلفة - بين الحمض الدهني والرابط، أو بين الرابط والببتيد - مما يؤدي إلى شوائب مختلفة. لقد قمنا بتركيب العديد من الشوائب المتعلقة بالأحماض الدهنية-لعملائنا، بدءًا من التساقط الكامل وحتى جزء صغير فقط.

dimers / البوليمرات
يتجمع اثنان أو أكثر من جزيئات التيلببتيد معًا لتكوين ديمر أو أعلى. يبلغ الوزن الجزيئي للدايمر ضعف الذروة الرئيسية، وغالبًا ما تكون قمة واسعة في HPLC، لذلك يجب فصلها وتنقيتها بشكل خاص قبل استخدامها كعنصر تحكم. لقد قمنا بتحضير الديمرات، واستغرق الأمر عدة جولات من التنقية للوصول إلى درجة نقاء تزيد عن 95%.

الشوائب المرتبطة بالرابط-
يستخدم تعديل الأحماض الدهنية للتيلببتيد رابطًا (على سبيل المثال، -Glu، PEG، وما إلى ذلك)، وقد ينتج هذا الرابط نفسه تفاعلات جانبية أثناء التخليق، مما يولد شوائب ذات روابط مفقودة أو غير كاملة. لا يوجد هذا النوع من الشوائب في الببتيدات الشائعة، ولكنه فريد من نوعه بالنسبة للتيلببتيد، والذي يحتاج إلى دراسة على وجه التحديد.

إزالة الشوائب
يتم إزالة مادة الأسباراجين (Asn) والجلوتامين (Gln) بسهولة تحت الظروف الحمضية أو الحرارية، مما يؤدي إلى تكوين أيزومرات. هناك العديد من Asn وGln في تسلسل التيلببتيد، وغالبًا ما تظهر شوائب إزالة الرطوبة في اختبار التحلل القسري، لذلك يجب استخدام منتج التحكم لتحديد موقع الشوائب.

أيزومرات غير متجانسة
خلال تخليق السلسلة الطويلة، قد تخضع الأحماض الأمينية الفردية للسباق، مما يؤدي إلى أيزومرات غير متجانسة. عادة ما يكون محتوى هذا النوع من الشوائب غير مرتفع، لكن الخبراء سيسألون عند الإعلان، ومن الأفضل أن يكون لديك منتج تحكم للتأكيد.

العديد من هذه الشوائب لا يمكن شراؤها وتحتاج إلى تصنيعها حسب الطلب. لقد قمنا بالكثير من المشاريع المتعلقة بتخصيص شوائب التيلببتيد، والتي تغطي جميع الفئات المذكورة أعلاه.

حذف سلسلة الببتيد
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%، مع تأكيد MS وNMR. لقد قمنا بتركيب مجموعة من الببتيدات مع مسافة 5 أحماض أمينية من الطرف N- إلى الطرف C-.

أكسدة الشوائب
Met in Tilpeptide is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control. The purity is >95% ويمكننا توفير طيف LC-MS لتأكيد درجة الأكسدة. يتم فصل السلفوكسيد والسلفون بواسطة HPLC، ويمكننا القيام بالأمرين معًا.

منتجات التخلص من الأحماض الدهنية
هذه واحدة من أصعب الشوائب التي يمكن التعامل معها في التيلببتيد. قد تكون سلسلة الأحماض الدهنية معطلة تمامًا، أو قد تكون معطلة جزئيًا (على سبيل المثال، ذرات الكربون القليلة الأخيرة مفقودة). يمكننا تجميع سلسلة من المتغيرات لمواضع مختلفة من السلسلة. في أحد المشاريع الأكثر تعقيدًا التي قمنا بها، طلب منا العميل تصنيع شوائب باستخدام 8 ذرات كربون مفقودة من سلسلة الأحماض الدهنية، واستغرق الأمر منا شهرين لإنجاز ذلك بشكل صحيح.

ديمر
يمكن تحضير الثنائيات التي تتكون من تفاعلات -الارتباط المتقاطع أو غير-التساهمية بطرق مختلفة وعزلها وتنقيتها لتوفير عناصر تحكم عالية النقاء. تعد عملية تنقية الديمرات شاقة، ولكن لدينا الخبرة اللازمة لمعرفة كيفية فصل المونومرات.

الشوائب المرتبطة بالرابط-
قد يكون الرابط (-Glu، PEG، وما إلى ذلك) مفقودًا أو غير مكتمل، مما يؤدي إلى سلسلة من الشوائب ذات الصلة. يمكننا تركيب متغيرات مختلفة مع الروابط المفقودة، أو الروابط المختصرة، أو الروابط غير المتطابقة، ومساعدتك في بناء أطياف هذه الشوائب.

إزالة الشوائب
بالنسبة لمواقع Asn وGln في التسلسل، يمكننا إعداد ضوابط الشوائب المنزوعة الرطوبة عن طريق التدهور القسري أو التوليف المستهدف. الفرق في الوزن الجزيئي بعد إزالة الرطوبة هو 1 فقط، وهو أمر ليس من السهل تمييزه بواسطة مرض التصلب العصبي المتعدد، لذلك نستخدم عادة الرنين المغناطيسي النووي أو الشروط الكروماتوغرافية الخاصة للتأكيد.

الشوائب المخصصة الأخرى
إذا وجدت شوائب جديدة غير معروفة في بحثك، فيمكننا مساعدتك في تحليل البنية وتركيبها. أرسل لنا العينات، وسنجري تحليل LC-MS، ونستنتج الهيكل، ثم التوليف الاتجاهي، ثم نقارن وقت الاستبقاء والطيف الكتلي لتأكيد الاتفاقية. لقد قمنا بهذه العملية عدة مرات ونسبة النجاح عالية جدًا.

تطوير الطريقة التحليلية والتحقق من صحتها
عند إعداد طريقة HPLC أو LC-MS، يلزم التحكم في الشوائب للتوطين وتحديد الفصل والتحقق من النطاق الخطي والاسترداد. بدون التحكم، يفتقد التحقق من صحة الأسلوب جزءًا منه. يطلب منا العديد من العملاء إجراء بعض الشوائب الرئيسية أولاً لإعداد الطريقة، ثم القيام بالباقي ببطء.

قياس الطيف الكتلي غير المتجانس
عندما يتم الإعلان عن دواء عام، يلزم إجراء تحليل نوعي وكمي شامل لشوائب العملية ومنتجات التحلل. يجب تأكيد موقع ومحتوى وبنية كل شوائب بواسطة منتج تحكم. وقد رأينا الإعلان عن المعلومات التي تم إرسالها لملئها، تسع مرات من أصل عشرة هي شوائب هذه القطعة ولم يفهمها.

دراسات الاستقرار
في حالة الاستقرار طويل الأمد- والاختبارات السريعة، من الضروري تحديد منتجات التدهور السائدة وما هو الاتجاه في المحتوى. مع التحكم في الشوائب، يمكننا تحديد الكمية ومراقبتها بدقة. كان أحد العملاء يقوم باستقرار إعداد التيلببتيد، ووجد أن ذروة التحلل نمت بسرعة كبيرة في ظل ظروف متسارعة، لذلك قمنا بتحليلها وتوليفها بواسطة MS لتأكيد البنية، ثم شعر العميل بالارتياح للإبلاغ عنها.

اختبار إصدار الدفعة
بعد التسويق، يجب اختبار كل دفعة من API أو التركيبة للتأكد من المادة المعنية. تعتبر ضوابط الشوائب أدوات أساسية لاختبار الإطلاق.

معلومات عن إعلانات الأدوية العامة
تعد دراسات الشوائب جزءًا رئيسيًا من معلومات التسجيل. إن توفير بيانات كاملة لتحديد مواصفات الشوائب والتحكم فيها يقلل بشكل كبير من مخاطر إصدار المراجعة.

الحالة 1: شركة أدوية، برنامج الأدوية الجنيسة التيلبيبتيد
إنهم يقومون بتطوير نسخة عامة من التيلبيبتيد ويحتاجون إلى مجموعة كاملة من ضوابط الشوائب للتحقق من صحة الطريقة. قمنا بتخصيص 12 شوائب لها: 5 ببتيدات مفقودة، و2 شوائب مؤكسدة، و1 ديمر، و2 منتج لتساقط الأحماض الدهنية، و2 شوائب مرتبطة بالرابط-. كل واحد منهم لديه نقاء أكثر من 95٪، ويرافقه بيانات MS وNMR. وقال قائد المشروع: "إن شوائب التيلببتيد تبلغ ضعف عدد الببتيدات الأخرى، ولكن يمكنك صنعها كلها، والبيانات كاملة، مما يوفر علينا الكثير من العمل". وفي وقت لاحق، تم بنجاح التحقق من صحة طريقتهم، وهم الآن يستعدون للإعلان.

الحالة 2: شركة CRO، تحديد ملامح الشوائب
لقد أجروا مشروعًا بحثيًا عالي الجودة حول التيلببتيد، الأمر الذي يتطلب تحليلًا شاملاً لشوائب العملية. أرسلوا لنا عينات الببتيد الخام، وقمنا بإجراء تحليل LC-MS، واستنتجنا الهياكل المحتملة للعديد من الشوائب غير المعروفة، ثم قاموا بتركيبها بطريقة مستهدفة، وقارنوا أوقات الاستبقاء وأطياف الكتلة، وأكدنا أربع شوائب جديدة - اثنان منها مرتبطان بالرابط-، واثنان منها عبارة عن متغيرات لتساقط الأحماض الدهنية. استخدم العميل هذه البيانات لتحسين ملفات تعريف الشوائب ونجح في اجتياز قبول العميل.

الحالة 3: دراسات الاستقرار، شركة التكنولوجيا الحيوية
لقد كانوا يفحصون ثبات تركيبة التلببتيد ووجدوا أن كمية منتج التحلل تتزايد بسرعة في ظل ظروف متسارعة، لكنهم لم يعرفوا ما هو. لقد قمنا بتحليل العينة بواسطة LC-MS وافترضنا أنها كانت عبارة عن شوائب إزالة الرطوبة في موقع Asn معين، ثم قمنا بتركيبها بطريقة مستهدفة وأكدناها عن طريق المقارنة. لقد أنشأوا اختبارًا باستخدام عنصر التحكم هذا وراقبوا بدقة اتجاه منتج التحلل. لاحقاً، عندما قدموا التقرير، تم التأكيد على هذا الجزء من البيانات من قبل الخبراء، وبسبب البيانات الصلبة، لم يتم إصدار أي تعويض.

يعتبر التيلببتيد منتجًا شائعًا، ولكن دراسة الشوائب هي مهمة حساسة، خاصة منتجات تقشير الأحماض الدهنية والشوائب المرتبطة بالروابط-، والتي لا يستطيع العديد من الشركات المصنعة التعامل معها. إذا كنت تقوم بإجراء بحث عالي الجودة أو تطوير عام للتيلببتيد وتحتاج إلى ضوابط للشوائب، فلا تتردد في الاتصال بنا. لقد قمنا بالكثير من العمل، ونعلم ما هي الصعوبات، ونعرف كيفية التغلب عليها.